大鼠直腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說(shuō)明書(shū)

注意事項(xiàng)：
. 接收到大鼠直腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說(shuō)明書(shū)，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的）。
3.嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。 

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大鼠直腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒【Rat Intestine PrimacellTM：Normal Rectal Smooth Muscle Cells】
     大鼠直腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說(shuō)明書(shū)平滑肌收縮是胃腸蠕動(dòng)中基本的運(yùn)動(dòng)方式。腸炎時(shí)由于平滑肌特殊肌動(dòng)蛋白的增加導(dǎo)致了平滑肌層的增厚。平滑肌肌動(dòng)蛋白可能影響收縮力的產(chǎn)生，這進(jìn)一步證明了炎癥時(shí)的腸平滑肌細(xì)胞具有可塑性。利用腸平滑肌細(xì)胞的培養(yǎng)，可以幫助了解收縮、增殖和胃腸道結(jié)締組織對(duì)平滑肌細(xì)胞的反應(yīng)。 雖然直腸組織機(jī)械韌性很強(qiáng)，但利用本公司試劑盒中提供的直腸組織分離體系來(lái)分離，EDTA/EGTA處理過(guò)的薄的直腸組織片能使得直腸組織中成直腸細(xì)胞的一些功能特性發(fā)生改變，從而將成直腸細(xì)胞分離開(kāi)來(lái)。

本試劑盒適用于分離培養(yǎng)新生兒或成年人的成直腸細(xì)胞。本體系提供了佳的組織分離條件，分離單個(gè)細(xì)胞的效率是已出版文獻(xiàn)中所報(bào)道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細(xì)胞在培養(yǎng)基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以大程度地降低所培養(yǎng)的成直腸原代細(xì)胞中成纖維細(xì)胞的含量。 大鼠直腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒適合于培養(yǎng)人的成直腸組織細(xì)胞。本試劑盒包含： （）OptiTDSTM大鼠直腸平滑肌細(xì)胞組織解離液（3×ml） （2）大鼠直腸平滑肌細(xì)胞組織處理緩沖液（00ml） （3）FibrOutTM大鼠直腸平滑肌細(xì)胞成纖維抑制劑（ml（500x）） （4）大鼠直腸平滑肌組織洗液（5x00 ml） （5）大鼠直腸平滑肌細(xì)胞生長(zhǎng)因子（ml 500x）及血清（5x0ml） （6）大鼠直腸平滑肌細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基（5 x00ml） （7）大鼠直腸平滑肌組織預(yù)備液（ x00 ml） （8）大鼠直腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)?

赭色擲孢酵母 Sporobolomyces salomonicolor

百脈根根瘤菌 Rhizobium loti

P85(小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×06cells/瓶×2

雙孢蘑菇

(含00mL 酶解緩沖液)0mL

小鼠淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基00mL

植物桿菌 Lactobacillus plantarum

費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii

MOLT-4全細(xì)胞裂解液00μg

覃狀青霉 Penicillium paxilli

大鼠直腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說(shuō)明書(shū)2-氟甲砜分子式：90.65英文名稱：2- phenyl methyl group：7205-98-3分子量： C7H7ClO2S

雙(五甲環(huán)戊二)錳分子式：325.39英文名稱：Double (five methyl cyclopentadienyl manganese)：67506-86-9分子量： C20H30Mn 0*

鄰二甲二丙酯（DPRP）英文名稱：The adjacent benzene two formic acid two (DPRP).分子式：250.29分子量： C4H8O4：3-6-8

5--2-溴-3-氯吡分子式：207.46英文名稱：5- amino -2- -3-：30284-52-5分子量： C5H4BrClN2

4-氯-6-乙氧喹啉分子式：英文名稱：4- -6-, ethyl：03862-63-分子量： CH0ClNO

性紅289英文名稱：Acid red 289分子式：676.73373分子量： C35H29N2NaO7S2：2220-28-9

氟銅分子式：0.54英文名稱：氟銅：7789-9-7分子量： CuF2

2,3-二甲溴分子式：85.06英文名稱：Two - methyl 2,3-：576-23-8分子量： C8H9Br

曲美孕酮英文名稱：QuMei progesterone分子式：342.47分子量： C22H30O3：7453-62-5

炔諾肟酯英文名稱：Acetylene and the分子式：369.5分子量： C23H3NO3：3589-28-7

培養(yǎng)步驟：
大鼠直腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說(shuō)明書(shū)對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。