小鼠腎足突細(xì)胞培養(yǎng)

注意事項(xiàng)：
. 接收到小鼠腎足突細(xì)胞培養(yǎng)，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細(xì)胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。 

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小鼠腎足突細(xì)胞【MouseKidney:KidneyPodocytes】
    小鼠腎足突細(xì)胞培養(yǎng) 產(chǎn)品描述：腎足突細(xì)胞是附著在腎小球基底膜外的高度分化的上皮細(xì)胞。足細(xì)胞之間鄰近的足突相互交替，形成了許多30～40nm的裂孔，孔上覆蓋一層厚4～6nm的裂孔隔膜,即腎小球足突間裂孔隔膜。后者是血漿蛋白通過脈管系統(tǒng)的后屏障，對于維持腎小球?yàn)V過屏障結(jié)構(gòu)與功能完整性發(fā)揮關(guān)鍵作用。公司提供的小鼠腎足突細(xì)胞采用膠原酶消化制備而來。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司產(chǎn)品小鼠腎足突細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒(MouseKidneyPrimaCell™:NormalKidneyPodocytesCatNo.3-428)來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞（如脂肪細(xì)胞、纖維細(xì)胞等）的污染，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，小鼠腎足突細(xì)胞可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。公司提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項(xiàng)；3、公司售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。?

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae平菇 Pleurotus sp.

小鼠腎上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基EL4(小鼠淋巴瘤細(xì)胞)

大鼠表皮黑色素細(xì)胞*培養(yǎng)基釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii成人真皮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基

MCF-7 [MCF7], 人腺細(xì)胞系宇佐美曲霉變種 Aspergillus usamii var.

嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus雜色云芝 Polystictus versicolor

糙皮側(cè)耳 Pleurotus ostreatus小白鼠肺成纖維樣細(xì)胞

小鼠肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基HUVEC-2, 人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞系

人角膜內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基亞膜漢遜酵母 Hansenula subpolliculosa

無花果曲霉 Aspergillus ficuum大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

小鼠腎足突細(xì)胞培養(yǎng)考馬斯亮藍(lán)G250英文名稱：Kaumas blue G250分子式：854.02分子量： C47H48N3NaO7S2：604-58-

4-乙炔甲分子式：6.6英文名稱：4- acetylene：766-97-2分子量： C9H8； CH3C6H4C≡CH

2,2,2,3',4'-五分子式：20.英文名稱：2,2,2,3', 4'- five benzene fussol：30292-28-3分子量： C8H3F5O

,3-雙(2,4,6-*)氯咪唑分子式：340.9英文名稱：,3- bis (2,4,6- three)：4556-45-8分子量： C2H25ClN2

聚(L-乳酸鈷-己內(nèi)酯-乙交酯鈷)分子式：英文名稱：Poly (L- lactic acid co caprolactone co glycolide)：34490-9-0分子量：

正丁亞砜分子式：62.29英文名稱：Butyl dimethyl：268-93-6分子量： C8H8OS

二氧硒英文名稱：Two selenium oxide分子式：0.96分子量： SeO2：2025852

二甲黃英文名稱：Two methyl yellow分子式：225.29分子量： C4H5N3； C6H5N=NC：22227

荊芥油英文名稱：Catnip oil分子式：分子量：：

花椒毒酚英文名稱：Prickly ash分子式：202.6分子量：CH6O4：

培養(yǎng)步驟：
小鼠腎足突細(xì)胞培養(yǎng)對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。