小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶（eNOS）酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存

小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存標(biāo)本要求
．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟
.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可向客服索取說明書》》 在線索取
2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中 先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品0μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7.溫育：操作同3。
8.洗滌：操作同5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色5分鐘。
0. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后5分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存保證產(chǎn)品質(zhì)量，*，質(zhì)量可靠，靈敏度高，效果穩(wěn)定。等優(yōu)點(diǎn)已經(jīng)得到廣大客戶的認(rèn)可，您可放心，且我司有專門的售后部門對(duì)您進(jìn)行全線跟蹤。
產(chǎn)品名稱：小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存
英文名稱： eNOS ELISA Kit
規(guī)格：96T/48T
存儲(chǔ)條件：2-8℃
有效期：6個(gè)月
特異性:本ELISA檢測(cè)試劑盒可同時(shí)檢測(cè)天然或重組的，且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。
檢測(cè)種屬：人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測(cè)試劑盒等種屬。
適用范圍：此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn)，禁用于臨床 。

小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存類型和操作步驟
ELISA可用于測(cè)定抗原，也可用于測(cè)定抗體。在這種測(cè)定方法中有3種必要的試劑：
①固相的抗原或抗體，
②酶標(biāo)記的抗原或抗體，
③酶作用的底物。根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的性狀以及檢測(cè)的具備條件，可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測(cè)方法。
（一）雙抗體夾心法、
（二）一步法、
（三）間接法測(cè)抗體、
（四）競(jìng)爭(zhēng)法。
小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存技術(shù)流程:
一、雙抗體夾心法(檢測(cè)未知抗原)
、用緩沖液將抗體稀釋至-0ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔，陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔)。
3、加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～小時(shí)，洗滌。
4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.ml，37℃ 0～30分鐘。
5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值：在ELISA檢測(cè)儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則40nm)處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.倍，即為陽性。
二、間接法(檢測(cè)未知抗體)
、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至-0ug/ml， 每孔加0.ml，4℃過夜。次日洗滌3次。
2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對(duì)照)
3、加酶標(biāo)抗體：于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.05ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.ml，37℃ 0～30分鐘。
5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值：在ELISA檢測(cè)儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則40nm)處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.倍，即為陽性。

TACSTD2    重組小鼠 TROP2 / TACSTD2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)    TACSTD2
CST6    重組小鼠 Cystatin E / CST6 蛋白 (His 標(biāo)簽)    CST6
CPA2    重組小鼠 Carboxypeptidase A2 / CPA2 蛋白 (His 標(biāo)簽)    CPA2
NOTCH    重組小鼠 Notch- / NOTCH 蛋白 (His 標(biāo)簽)    NOTCH
IFNA2    重組小鼠 IFNA2 / Interferon alpha 2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)    IFNA2
RETN    重組小鼠 Resistin / ADSF / RETN 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)    RETN
PDPN    重組小鼠 Podoplanin / PDPN 蛋白 (His 標(biāo)簽)    PDPN
VTCN    重組小鼠 B7-H4 / B7S / B7x 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)    VTCN
SIRPA    重組小鼠 SIRP alpha / CD72a 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)    SIRPA
LILRB3    重組小鼠 LILRB3 / LIR3 / ILT5 / CD85a 蛋白 (His 標(biāo)簽)    LILRB3
SIRPA    重組小鼠 SIRP alpha / CD72a 蛋白 (His 標(biāo)簽)    SIRPA
ROBO4    重組小鼠 ROBO4 蛋白 (His 標(biāo)簽)    ROBO4
B2M    重組小鼠 B2M / Beta-2-microglobulin 蛋白 (His 標(biāo)簽)    B2M
SERPINI    重組小鼠 SerpinI / Neuroserpin 蛋白 (His 標(biāo)簽)    SERPINI非變性法蛋白沉淀試劑盒    0 次    
水蛭素溶液，2mg/mL    0.mL    
7-020    MboI    500U
小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存3003-0    HRP 標(biāo)記的抗地高抗體    0μL
Tuner(DE3)plysS 菌種    mL    
多酚氧化酶 ( 菌菇 )    25KU    
中提柱式 BAC DNAout    5次    
*熱穩(wěn)定單鏈結(jié)合蛋白    50μg     
R002-    RNA 分析技術(shù)服務(wù)    次
30698-25    3´-O-Me-m7G(5´)ppp(5´)G 帽結(jié)構(gòu)類似物    25 OD
抑制劑    5mg