人肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞永生化；HIBEpiCs-SV40T

人肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞永生化；HIBEpiCs-SV40T

本公司所有產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn)，不做其他科學(xué)實(shí)驗(yàn)外的使用！

商品詳情：

種屬來(lái)源；人

組織來(lái)源；肝

生長(zhǎng)特性；貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞形態(tài)；上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞代數(shù)；10代以內(nèi)

細(xì)胞規(guī)格；1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測(cè)；無(wú)

培養(yǎng)基；專(zhuān)用培養(yǎng)基

培養(yǎng)條件；氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件；無(wú)血清凍存液，液氮儲(chǔ)存

細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為主。

將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6 cm皿中，加入約4 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第三天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02% EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤(rùn)所有細(xì)胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1 -3min（視細(xì)胞消化情況而定），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。

c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；

a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。

b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。

c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng) ：

一、 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

二、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。

三、用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

四、貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

五、 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

六、 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。

七、該細(xì)胞僅供科研使用。

八、備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。     收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 。

九、 注意：  1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。

公司正在出售的產(chǎn)品：

半乳糖凝集素4(GAL4)重組蛋白 Recombinant Galectin 4 (GAL4)

FLRT1 Protein Human 重組人 FLRT1 蛋白

ACPP重組小鼠 Prostatic Acid Phosphatase / ACPP 蛋白 Protein

IFNGR1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 蛋白

AK4重組人 AK4 / Adenylate Kinase 4 / AK3L1 蛋白 Protein

LY9重組小鼠 LY9 / CD229 / SLAMF3 蛋白 Protein

AMH/MIS Muellerian抑制因子抗原 1mgAMH/MIS Muellerian抑制因子抗原

ANGPTL4重組人 ANGPTL4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

FLRT1 Protein Human 重組人 FLRT1 蛋白

HEPACAM2 Protein Rat 重組大鼠 HepaCAM2 蛋白

小鼠素釋放素受體(GHR)檢測(cè)試劑盒 96T/48T

Rat coagulation factor IX (FIX) ELISA Kit 大鼠IX(FIX)檢測(cè)試劑盒

HumanComplemefragme4a,C4aELISAKit 人過(guò)敏毒素/補(bǔ)體片斷4(C4a)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanbasicfibroblastgrowthfactor9,bFGF-9檢測(cè)試劑盒人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子9(bFGF-9)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物直鏈淀粉比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

Humaerminaldeoxynucleotidylansferase,TdTELISAKit人末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TdT)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞永生化；HIBEpiCs-SV40T豚鼠內(nèi)皮素1(ET-1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

豚鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

豚鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

大鼠可溶性CD80(sCD80)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： sCD80 ELISA Kit

Mouse desmin (Des) ELISA Kit 小鼠結(jié)蛋白(Des)檢測(cè)試劑盒

MouseAlanineaminoansferase,ALTELISAKit 小鼠氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforhumanParathyroidhormone,PTHELISAKit人甲狀旁腺激素

同位素標(biāo)記法細(xì)胞端粒酶活性AP電泳分析試劑盒10次

ELISAKitPI3K大鼠0酸肌醇3激酶