B16-F10 小鼠黑色素瘤細(xì)胞

細(xì)胞處理：

1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實驗使用。

B16-F10 小鼠黑色素瘤細(xì)胞

商品屬性

商品介紹

細(xì)胞特性

1） 來源：小鼠黑色素瘤

2） 形態(tài)：上皮細(xì)胞樣  貼壁生長

3） 含量：>1x10^6 細(xì)胞數(shù)

4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5）用途：僅供科研使用。

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：

（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時，進行傳代。

（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。

（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。

（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。

（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。

（9）細(xì)胞凍存

細(xì)胞接收后的處理：

1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。

2）請在4或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對細(xì)胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細(xì)胞需要離心回收。

公司正在出售的產(chǎn)品：

SDF-1/CXCL12 (stromal cell derived factor-1 0.5mgSDF-1/CXCL12 (stromal cell derived factor-1) 基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1(抗原)

APCDD1 Protein Human 重組人 APCDD1 蛋白

HA重組甲型流感 H5N1 (A/goose/Guiyang/337/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

IL1RN Protein Human 重組人 IL-1RA / IL1RN 蛋白

TNFRSF17重組人 TNFRSF17 / BCMA / CD269 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

HA重組甲型流感 H5N1 (A/goose/Guiyang/337/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

SDF-1/CXCL12 (stromal cell derived factor-1 0.5mgSDF-1/CXCL12 (stromal cell derived factor-1) 基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1(抗原)

TNFRSF17重組人 TNFRSF17 / BCMA / CD269 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

APCDD1 Protein Human 重組人 APCDD1 蛋白

IL1RN Protein Human 重組人 IL-1RA / IL1RN 蛋白

豬巨噬細(xì)胞性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA 試劑盒

Collagen II (HCB II) ELISA Kit 人膠原蛋白Ⅱ(HCBⅡ)檢測試劑盒

PorcineEpinephrine/Adrenaline,EPIELISAKit 豬(EPI)檢測試劑盒 進口分裝

CLIAKitforALT/GPT(HumanAlanineAminoansferase)ELISAKit人轉(zhuǎn)氨酶/谷轉(zhuǎn)氨酶

血液活化10(FACTORXa)活性熒光定量檢測試劑盒20次

PlaVitaminB12,VB12ELISAKit植物B12(VB12)檢測試劑盒

B16-F10 小鼠黑色素瘤細(xì)胞豬肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)檢測試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

豬氧化酶(DAO)檢測試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

豬端粒酶(TE)檢測試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

豬凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)檢測試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

大鼠B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)檢測試劑盒 ，英文名： Bcl-2 ELISA Kit

Rabbit tissue factor pathway inhibitor (TFPI) ELISA Kit 兔組織因子途徑抑制物(TFPI)檢測試劑盒

Mouseierferon-inducibleprotein16,IFI16/p16ELISAKit 小鼠γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)檢測試劑盒 進口分裝

CLIAKitforhumaoll-likereceptor2,TLR2ELISAKit人toll樣受體2

通用型血液酶1(PON1)有機0酸酶活性比色法定量檢測試劑盒20次

大鼠癌標(biāo)志物-CA153ELISAKit大鼠癌標(biāo)志物-CA153ELISAKit，大鼠癌標(biāo)志物-CA153ELISAKit，