TSZ Elisa試劑盒檢測系統(tǒng)是免疫學(xué)反應(yīng)應(yīng)用到科研中zui為靈敏的技術(shù)手段，有著十分重要的作用。操作步驟雖然看起來比較簡單但是實(shí)驗(yàn)過程有很多的操作要點(diǎn)需要掌握，操作步驟中如果稍有不慎，操作不合理的地方，就會造成很多問題從而影響到檢測的準(zhǔn)確性，大大降低試驗(yàn)質(zhì)量。比如說花板，假陽性，全顯色，全部顯色，顯色比空白還低……這就需要我們在實(shí)驗(yàn)過程中多做總結(jié)，逐步完善，還有就是要多多學(xué)習(xí)，分享學(xué)習(xí)心得。下面就大體總結(jié)一下ELISA實(shí)驗(yàn)的常見問題和解決方法，同大家一起分享。
、包被原的性質(zhì)很重要，蛋白濃度，是否降解，這關(guān)系到你做出的抗體可不可以被其識別，所以保存抗原很重要，我做重組蛋白時，師兄都嚴(yán)格警告我一定要在冰浴下緩慢融化就是這個道理。還有有的包被原可能不是蛋白，對于和脂類物質(zhì)或小分子物質(zhì)我們要事先對其改造再加以包被，我把方法簡要的列出如下:①親和素:先親和素先包被載體，加入化的DNA，這種包被方法均勻、牢固，已擴(kuò)大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測定。②脂類物質(zhì):可將其在有機(jī)溶劑（例如乙醇）中溶解后加入ELISA板孔中，開蓋置冰箱過夜或冷風(fēng)吹干，待酒精揮發(fā)后，讓脂質(zhì)自然干固在固相表面。③小分子必須依靠和大的蛋白載體偶聯(lián)后才能固定在固相載體上。
2、包被液的選擇，一般選擇ph9.6的碳酸鹽緩沖液。但有時由于試驗(yàn)的需要，包被原的特殊性也可能采用中性的緩沖溶液來包。應(yīng)注意以下原理：由于蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用，TSZ Elisa試劑盒這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等的影響，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán)，故更易吸附到固相載體表面。具體的試驗(yàn)還要有堅固的理論外也要實(shí)踐，看一下zui終可不可以應(yīng)用到自己試驗(yàn)當(dāng)中去。常用的包被液除了剛才提到的pH9.6碳酸鹽緩沖液，還有pH7.2的磷酸鹽緩沖液和pH7-8的Tris-HCL緩沖液等等。
bis(2-methoxyethyl)amine    對異氰酸酯    40736    Methyl Isovalerate
雙(2-甲氧基乙基)胺    04-2-    40737    methyl levulinate
-95-5    4-chlorobenzylmethylamine    40738    Methyl Mercaptan
Di-n-butylamine    N-甲基-4-氯芐胺    40739    methyl o-anisate
二丁胺    04--0    40746    Methyl pentafluoropropionate
-92-2    p-aminophenylethanol    40747    Methyl pentanoate
2-(2-Ethoxyethoxy)ethanol    對氨基苯乙醇    40749    Methyl propionate
二甘醇單    04-0-9    40750    methyl p-tolyl sulphide
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