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              技術(shù)文章

              Elisa試劑盒檢測抗生素的原理
              點擊次數(shù):868 更新時間:2019-10-28
                     氨基糖類、四環(huán)素類、喹諾酮類、硝基呋喃類等。目前國內(nèi)外可以用ELISA方法檢測的抗生素有:、、四環(huán)素、、呋喃它酮、、、泰樂菌素、磺胺喹惡啉、、鹽霉素、磺胺類、阿維霉素、ELISA試劑盒檢測成本低靈敏度高檢測限通??梢赃_到*,是一種理想的初篩方法。但由于ELISA方法存在一定的假陽性率,因此用美聯(lián)免疫吸附法測定的陽性樣品必須做進一步的確定實驗。
                現(xiàn)在已ELISA試劑盒檢測為例介紹;本試劑盒適用于牛奶、肉類、魚、蝦、血清、及蜂蜜中的殘留量的測定。
               ?。ㄒ唬y定原理
                測定的基礎(chǔ)是抗原抗體放映。微孔板包被有針對兔IgG(抗體)的羊抗體。加入抗體、標記物、標準或樣品溶液、游離與酶標記物競爭抗體,同時抗體與羊抗體連接。沒有連接的酶標記物在洗滌步驟中被去除。將酶基質(zhì)(過氧化尿素)和發(fā)色劑(四甲基聯(lián)苯胺)加入到空中并且孵育。結(jié)合的酶標記物將無色的發(fā)色劑轉(zhuǎn)化為藍色的產(chǎn)物。加入反應(yīng)停止液后使眼色由藍色轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色。在450nm處測量,吸收光強度與樣品中的濃度成正比
               ?。ǘ┰噭┖兄笜?/div>
                特異性
                通過對形影的物質(zhì)進行交叉反應(yīng)性分析得到
                00%堿0.5%<0.05%
                余四環(huán)霉素變暗霉素無交叉反應(yīng)
                回收率
                牛奶>80%魚蝦肉>80%
                蜂蜜>80%蛋類>80%
               ?。ㄈ┨峁┑脑噭?/div>
                、96孔(2條*8孔)包被有羊抗體。
                2、濃縮標準液;為標準溶液。
                3、過氧化物酶標記的濃縮液:0.7mL
                4、抗體濃縮液0.7ml
                5、基質(zhì)(7ml)含有氧化尿素
                6、四甲基聯(lián)苯胺(TMB)30%過氧化氫,牛血清白蛋白,圖文20等
                7、反應(yīng)停止液mol/L硫酸
                8、緩沖液:00ml用于標準酶標記物抗體樣品稀釋
                9、緩沖液2:ml,用于測定牛奶樣品時的標準稀釋用緩沖液

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