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              技術文章

              TSZ Elisa試劑盒工作濃度的選擇
              點擊次數(shù):1032 更新時間:2017-10-27

              TSZ Elisa試劑盒在免疫酶技術中,首先要確定的變異因素就是酶標記物的工作濃度。因為酶標記物濃度的很小變化,便可導致試驗結果產(chǎn)生很大的波動。另外,由于濃度過高,可使非特異性反應增加,而濃度過低又可影響測定的敏感性。因此,正式試驗前必須準確滴定其工作濃度。

              酶標記抗體的滴定方法是:將抗原(或抗體)物理吸附于固相載體上,然后將經(jīng)過一系列稀釋的酶標抗體(或抗Ig抗體)與吸附在載體上的抗原(或抗體)起反應,以酶與底物的顯色反應程度來確定酶標記抗體的效價,或稱工作濃度。

              其步驟為:先將抗原(或抗體)用0.05M PH9.6包被緩沖液稀釋為0μg/ml左右,于聚苯乙烯板孔內(nèi)加0.ml,4℃**,次日以洗滌緩沖液洗滌3次。酶標記抗體用%BSA-PBS液依次稀釋成∶00,∶200,∶400,∶800,∶600……(根據(jù)據(jù)抗體的滴度而定),分別加入反應孔中,每個稀釋度二孔,每孔0.ml,37℃孵育小時后洗滌。然后加底物液,每孔0.ml,37℃0~30分鐘。以2M H2SO4 0.05ml終止反應。

              結果判定主要以ELISA比色儀讀取各孔OD值。并以OD為縱座標,結合物濃度為橫座標,繪制滴定曲線。由曲線上查得OD值為.0左右,且曲線斜率zui大時的酶標抗體稀釋度,即為該標記物的工作濃度。

              有關試驗的試劑及器材均見TSZ Elisa試劑盒部分。
              250G    鹽酸胍    蛋白組學級    GUANIDINE HYDROCHLORIDE        8-88-9
              500G    鹽酸胍    蛋白組學級    GUANIDINE HYDROCHLORIDE        8-88-9
              00G    溴酚藍,鈉鹽    蛋白組學級    BROMOPHENOL BLUE SODIUM SALT        7720-78-7
              50G    溴酚藍,鈉鹽    蛋白組學級    BROMOPHENOL BLUE SODIUM SALT        7720-78-7
              00MG    辛基-β-D-硫代吡喃葡萄糖苷    蛋白組學級    OCTYL-B-D-THIOGLUCOPYRANOSIDE        7720-78-7
              G    辛基-β-D-硫代吡喃葡萄糖苷    蛋白組學級    OCTYL-B-D-THIOGLUCOPYRANOSIDE        7782-63-0
              G    辛基-β-D-吡喃葡萄糖苷    蛋白組學級    OCTYL-B-D-GLUCOPYRANOSIDE        7782-63-0
              500MG    辛基-β-D-吡喃葡萄糖苷    蛋白組學級    OCTYL-B-D-GLUCOPYRANOSIDE        7782-63-0
              TSZ Elisa試劑盒

               

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